Специальный агент ФБР Дэйна Скалли получила образование по физике и медицине. Ее биография до начала ее работы с Малдером была довольно простой: по окончании университета и медицинской школы она поступила в Академию ФБР, после обучения в которой два года преподавала там судебную медицину. Она была замечена начальниками Малдера и назначена в отдел "X-файлов" в качестве его напарника. Они рассчитывали, что она сумеет опровергнуть безумные теории Малдера, тем самым дав повод для прекращения его работы. Но Скалли оказалась слишком принципиальным человеком, чтобы играть в такие игры: она убедилась, что за этими расследованиями скрывается реальная разгадка таинственных преступлений, и решила поддержать Малдера в его работе. Довольно скоро она стала самым верным его союзником и лучшим другом, за что ей приходится платить высокую цену: она была похищена и была возвращена спустя три месяца, не помня, что с ней произошло за это время; затем выяснилось, что ей был вживлен микрочип, возможно, способный читать мысли; затем она узнает, что смертельно больна - у нее находят рак; едва опасность смерти минует, Скалли узнает, что у нее есть дочь - и девочка умирает через несколько дней...

Специального агента ФБР Фокса Малдера его коллеги и начальство считают слегка чокнутым, ( и всвязи с этим ему дали кличку Spooky "стремный, больной" ), но его блестящий талант криминалиста заставляет их ценить его.Поэтому он все еще продолжает работать в Бюро, хотя и стал среди его сотрудников чем-то вроде чужака, аутсайдера. Малдер страстно увлечен работой над "X-файлами", и у него есть на то свои личные причины: когда ему было двенадцать, его младшая сестра Саманта бесследно исчезла прямо из дома. Он не помнил ничего о том, что с ней произошло, а он был единственным, кто был в это время дома вместе с ней. Позднее он прошел сеанс регрессивного гипноза, и у него появилась уверенность в том, что его сестру похитили пришельцы: он вспомнил яркий свет, который парализовал его и забрал Саманту. Малдер сделал поиски сестры делом своей жизни, и именно они привели его на работу с "X-файлами".